Erwerb von Virenrohstoffen

Screening von künstlichen Diäten in Innenräumen

Auf der Grundlage der Ernährungsgewohnheiten von Helicoverpa armigera werden 3 bis 5 künstliche Ernährungsformen untersucht.die Formulierung, die eine kontinuierliche Aufzucht und eine hohe Eierlegungskapazität unterstützt, für die Produktion ausgewählt wird.

Innenzucht von Helicoverpa armigera

Wildgefangene Baumwollwürmer werden durch eine schrittweise Ersatzfütterung domestiziert: reines pflanzliches Futtermittel → gemischtes pflanzliches und künstliches Futtermittel → vollständiges künstliches Futtermittel,zur Festlegung eines Laborstammes für die Massenzucht.

Virenimpfung

Wenn etwa 80% der Larven das dritte Stadium erreicht haben, werden gereinigte Virussamen (frei von verschiedenen Bakterien) in eine Virussuspension mit einer Konzentration von 1,0×104 bis 1,0×107 PIB/ml verdünnt.der in die Ernährung für die Larvenfütterung eingemischt wird.

Sammlung kranker, toter Larven

Die Beobachtung beginnt 3 Tage nach der Fütterung der mit dem Virus kontaminierten Nahrung.Tot und sterbende Larven mit geschwollenen Körpern und rötlichem Bauch werden zweimal täglich (morgen und abend) gesammelt, bis die Sammlung abgeschlossen ist.

Extraktion und Aufbewahrung von Viren

Der Prüfstoff wird mit einem Multifunktionshomogenisierungsgerät in eine gelöste Menge deionisiertes Wasser auf die Larvenkörper gesetzt und in Schlamm gemahlen.Das Schleifen wird beendet, sobald die Partikelgröße den Spezifikationen entspricht.

Erkennung und Zählung

Die Identifizierung und die quantitative Zählung erfolgen mit Hilfe eines Elektronenmikroskops bzw. eines optischen Mikroskops.

Virenspeicherung

Qualifizierte Virussuspensionen werden in versiegelte Kunststofffässer gefüllt und für die spätere Verwendung in einem kalten Lager bei -10°C bis -20°C gelagert.