Insektizide Wirkung und Biokontrollwirkung von Autogra pha californica multiplenucleopolyhedrovirus (AcMNPV) auf Larven der Spodoptera frugiperda

Abstrakt

Der Herbstheerwurm, Spodoptera frugiperda, ist einer der wichtigsten Maisschädlinge, der vor kurzem nach China eingedrungen ist. Um die Kontrollwirkung zu bestimmen Autographa californica multiples Nukleopolyhedrovirus (AcMNPV) auf Larven von S.frugiperda, die insektizide Aktivität und die Biokontrollwirkung von AcMNPV auf S.frugiperda wurden mit den Methoden Bioassay und Feldwirksamkeitstest untersucht und analysiert. Die Ergebnisse zeigten, dass die mittlere tödliche Konzentration (LC₅₀)von AcMNPV wirkt auf die 2^ndLarvenstadium von S. Frugiperda war 2,9x 10⁷PIB/ml. Die durchschnittliche Kontrollwirksamkeit beträgt 10⁷PIB/ml AcMNPV+Bt-Suspension (1500 ml/hm²) auf S.frugiperda betrug 68,99 % am 10^ThTag und 66,87 % am 15^ThTag nach der Verabreichung. Schließlich wurde die DNAMAN 6.0-Software verwendet, um die DNA-Homologie der toten Insekten zu identifizieren, und die Ergebnisse zeigten, dass die Polh-, Lef-8- und Lef-9-Gensequenzsequenzen des toten Insekts und der S．Frugiperda 100 betrugen % identisch. Alle oben genannten Ergebnisse könnten weiter bestätigen, dass AcMNPV eine Schlüsselrolle bei der Bekämpfung von S．frugiperda spielen könnte. Es wird vorgeschlagen, dass 10⁷PIB/ml AcMNPV＋Bt Suspension (1500 ml/hm²) sollte auf dem Höhepunkt des Auftretens der jungen Larven von S.frugiperda und nach 16:00 bis 17:00 Uhr an einem sonnigen Tag angewendet werden, um den Einfluss von hohen Temperaturen und Licht zu vermeiden, damit das Viruspräparat besser wirken kann Rolle und verbessern seine Kontrollwirkung auf S.frugiperda．

Schlüsselwörter: AcMNPV;Spodoptera frugiperda;Lepidopteranpest;Larve;Bio-Pestizid;AcMNPV+Bt-Federung;insektizide Wirkung;Grüne Prävention und Kontrolle

Spodoptera frugiperda ist ein alles fressender Wanderschädling, der erstmals 2019 von Myanmar nach China gelangte und sich rasch auf 1.518 Bezirke in 26 Provinzen und Gemeinden in China ausgebreitet hat, was eine ernsthafte Bedrohung für die Ernährungssicherheit Chinas darstellt. Bisher wurde in der Kontrollstrategie von Armyworm Die Bekämpfung des Heerwurmausbruchs hängt immer noch vom starken Einsatz chemischer Pestizide ab.Der übermäßige Einsatz chemischer Pestizide kann leicht zu Schädlingsresistenzen führen, sich erneut ausbreiten und zu Rückständen und Umweltverschmutzung führen.Eine Reihe schwerwiegender Probleme haben die nachhaltige Entwicklung der modernen Landwirtschaft erheblich eingeschränkt. Daher ist der Einsatz biologischer Bekämpfungsmethoden oder der Ersatz von Biopestiziden erforderlich.Der Einsatz von Pestiziden zur Bekämpfung des Heerwurms wird immer wichtiger und erhält immer mehr Aufmerksamkeit.

Autographa californica multiples Nukleopolyhedrovirus AcMNPV ist ein in mehreren Körnern eingebettetes nukleares Polyedervirus, das aus der Larve von Argyria alfalfa isoliert wurde. Es kann mehr als 30 Arten von Schmetterlingsschädlingen wie Rübenmotte, Kohlmotte, Argyria argyra und Calyptera teristoides kreuzinfizieren Der gemischte Typ mit Bt und anderen Insektiziden und Nichtzielschädlingsviren als Synergisten hat eine offensichtliche synergistische Wirkung auf viele Noctuidae-Schädlinge, erweitert das insektizide Spektrum weiter und verbessert die insektizide Wirkung.AcMNPV ist ein neues Biopestizid gegen Insektenviren, das von Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD. entwickelt wurde.Es handelt sich um eine Kombination aus dem nuklearen Polyedervirus Argyria alfalfa und dem potenten Bt-Virus-Synergisten.Aufgrund seiner guten insektiziden Wirkung wird A häufig in Gemüse-, Obst-, Reis- und anderen Feldern eingesetzt.In diesem Artikel wurden die insektizide Aktivität und die biologische Kontrollwirkung des Autographa californica mul-tiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) gegen Spodoptera frugiperda durch Laboraktivitätstests und Feldexperimente nachgewiesen und bewertet, um Daten für die breite Anwendung des nuklearen Polyedervirus zu liefern die biologische Bekämpfung von Spodoptera frugiperda in Mais.Es bietet eine theoretische Grundlage für die Registrierung und Anwendung des Suspensionsmittels AcMNPV plus Bt bei der Bekämpfung von Heerwürmern.

1.Materialen und Methoden

1.1Testen Sie Viren und biologische Arbeitsstoffe

Das getestete Virus war Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV). Am 20. Mai 2019 wurde Spodoptera frugiperda auf dem Maisfeld in der Stadt Xiantao, Provinz Hubei, gesammelt und der Virusinfektions-Screeningtest im Labor von Wuhan Unioasis Biological Technology Co. durchgeführt. , GMBH.(Bei dem Autographa Californica multiplenucleopolyhedrovirus AcMNPV weist eine hohe infektiöse Aktivität gegen Spodoptera frugiperda auf). wurde bei 600 U/min und 300 U/min zentrifugiert. Die Mikrozahl betrug 1,8 × 10¹⁰virulente Polyeder pro ml(Polyhedralinclusionbody PIB), d¹⁰PIB/ml), bei niedriger Temperatur konserviert und beiseite gestellt.

Der getestete biologische Wirkstoff war Autographa californianuclear polyhedrose.Bacillus thuringiensis, kurz AcNPV.Bt (1,0 × 107 PIB/ml).Es wird von Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD entwickelt und von seiner Tochtergesellschaft Wuhan Chuqiang Biological Technology Co., LTD hergestellt.

1.2Insekten testen

Das Versuchsinsekt war Spodoptera frugiperda.Am 20. Juli 2019 wurden die Larven von Spodoptera frugiperda vom Sommermaisfeld im Dorf Banqiao, Stadt Dachangzhen, Kreis Tongshan, Provinz Hubei, gesammelt und in das Labor des Forschungsinstituts für Pflanzenschutz, Boden und Düngemittel der Agrarakademie Hubei zurückgebracht Wissenschaften. Frische und zarte Maisblätter wurden einzeln in Einweg-Petrischalen aus Kunststoff (Durchmesser 8 cm, Höhe 3 cm) gefüttert.Die Fütterungsbedingungen im Innenbereich betrugen: (25 ± 1) ℃ und die relative Luftfeuchtigkeit 60–70 %, die Photoperiode betrug 16L:8D.Nach mehreren Reproduktionsgenerationen werden frische und sterilisierte Eiblöcke zur Verwendung aufbewahrt.

1.3Laboraktivität des Autographa californica Multiple Nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) gegen Spodoptera frugiperda

Sechs Konzentrationsgradienten, 1,0 × 10⁹, 1,0 × 10⁸, 1,0 × 10⁷, 1,0 × 10⁶, 1,0 × 10⁵, 1,0 × 10⁴wurden in diesem Experiment entworfen. Zunächst wurde der TC von AcNPV auf 1,0 × 10 verdünnt⁹PIB/ml und dann 10-fach verdünnt, um andere Verdünnungsmittel mit unterschiedlichen Konzentrationen zu erhalten. Das Experiment wurde mit einer Blindkontrolle durchgeführt. Insgesamt wurden 7 Prozesse durchgeführt, wobei jeder Prozess dreimal wiederholt wurde.

Es wurde die Methode der Blattsegmentfütterung angewendet, das heißt, frische junge Maisblätter (Länge 2 cm × Breite 2 cm) wurden zunächst mit Virussuspensionsspray behandelt, dann wurden die Larven gefüttert und einzelne Köpfe wurden in Petrischalen gefüttert.Die Fütterungsstreifen waren: Temperatur (25 ± 1)℃, Phase-zu-Feuchtigkeit (60 % ~ 70 %), Photoperiode (16L:8D). Nachdem die giftigen Maisblätter gegessen wurden, sollten frische, ungiftige Maisblätter hinzugefügt werden sofort.48 Larven des Heerwurms im zweiten Stadium wurden wiederholt behandelt.Referenzteil 9{9-11}, Unter Berücksichtigung der Veränderungen der Proliferation des Virus in den Zellen und Wirten der Mottenfamilie, der Anzahl toter Insekten aufgrund des Virus und Die Gesamtzahl der toten Insekten wurde 7 und 10 Tage nach der Infektion untersucht, die Sterblichkeitsrate berechnet und LC50 berechnet.

1.4Feldtest zur Kontrollwirkung von 10 Millionen AcMNPV.Bt-Suspensionen auf Armyworm-Larven

Der Feldwirksamkeitstest wurde auf dem Sommermaisfeld des Dorfes Xiaoyuan, Gemeinde Chuangwang, Kreis Tongshan, Provinz Hubei, durchgeführt.Das Testgrundstück ist insgesamt 1500 m groß^２, der Bodentyp ist kalkhaltiger Boden, der pH-Wert beträgt 6,8, der Gehalt an organischer Substanz beträgt 13,9 % und die Fruchtbarkeit ist mittel bis hoch. Mais wird das ganze Jahr über gepflanzt und die Maissorte ist Xiyu Nr. 3. Am 13. Juli ,2020, 45% Mehrnährstoffdünger 750kg/hm^２wird als Grunddünger ausgebracht und gesät.Seit 2019 kam es auf diesem Feld zu einem schwerwiegenden Auftreten des Herbst-Heerwurms.

Insgesamt 10 Millionen AcMNPV.BT-Suspensionen (1500 ml/hm²) und 15 % Emamectinbenzoat. Indocarb-Suspension (300 ml/hm²), häufig verwendetes Insektizid und Blindkontrolle wurden mit drei Behandlungen behandelt.Jede Behandlung wurde viermal wiederholt, wobei insgesamt 12 Versuchsparzellen mit einer Fläche von jeweils 100 m² angelegt wurden²

Sprühen Sie das Pflanzenschutzmittel am Nachmittag des 26. August 2020 (wenn die Larven von Spodoptera frugiperda häufig vorkommen) einmal abends auf.Es wird das Multifunktions-Rucksack-Elektrospray 3WBJ-16DZ der Marke Lebang mit einem Arbeitsdruck von 0,40 bis 0,60 MPa, einem Öffnungsdurchmesser von 1 mm und einer Durchflussrate von 60 bis 85 l/h verwendet.Der Tag der Pestizidanwendung ist sonnig mit einer Temperatur von 23–32 °C.Führen Sie Umfragen am 1., 3., 5., 7., 10. und 15. Tag nach der Antragstellung durch.Während der Untersuchung wurden von jeder Parzelle 10 Stichprobenpunkte entnommen und an jedem Punkt 10 Pflanzen kontinuierlich untersucht, insgesamt also 100 Pflanzen.Auf jeder Maispflanze wurden die Anzahl lebender Insekten, Todesfälle, Vergiftungen und natürliche Feinde erfasst.Die entsprechende Berechnungsformel lautet wie folgt;

Abnahmerate der Insekten = (Anzahl lebender Insekten vor der Anwendung – Anzahl lebender Insekten nach der Anwendung)/Anzahl lebender Insekten vor der Anwendung

Präventions- und Bekämpfungseffekt = (Verringerung der Insektenrate im Behandlungsbereich – Verringerung der Insektenrate im Kontrollbereich)/(100 – Verringerung der Insektenrate im Kontrollbereich)*100 %

1.5Molekulare Identifizierung von ACMNPV

1) Testen Sie Virenproben.Wählen Sie die ACMNPV-Mutterlauge zur Bestimmung der Aktivität in Innenräumen (Probe 1), das biologische Präparat 10 Millionen ACMNPV.Bt SC (Probe 2), virusinfizierte Insektenleichen nach Feldwirksamkeitstests (Probe 3) und die mit infizierten Larven der zweiten Generation von Heerwürmern Insektenkadaver, die in Probe 3 (Probe 4) als Testvirusproben gesammelt wurden, um zu überprüfen, ob AcMNPV in den 10 Millionen ACMNPV.Bt eine bakterizide Aktivität gegen Heerwurmlarven im Herbst aufweist.

2) DNA-Extraktion.Nehmen Sie 1,0 ml AcMNPV-Probe, geben Sie 99,0 ml destilliertes Wasser hinzu und lassen Sie 1 Minute lang gründlich oszillieren.Nehmen Sie nach der Oszillation 300 μl Suspension, geben Sie 100 μl alkalische Cracklösung hinzu und lassen Sie das Wasser 30 Minuten lang bei 37 °C einweichen.200 μl Tris·HCl-Puffer hinzufügen und 8 Minuten lang bei 10.000 U/min zentrifugieren.Den Überstand in ein Zentrifugenröhrchen geben, 5 μl Protease K und 60 μl SDS hinzufügen, 2 Stunden lang bei 65 °C im Wasserbad baden, herausnehmen und auf Raumtemperatur abkühlen lassen.Geben Sie 650 μl Mix L Tris-gesättigtes Phenol gut hinzu, zentrifugieren Sie 5 Minuten lang bei 10.000 U/min und geben Sie den Überstand in ein neues Zentrifugenröhrchen.Fügen Sie 650 μl gemischte Flüssigkeit aus Phenol und Chloroform (Volumenverhältnis 1:1) hinzu, zentrifugieren Sie 5 Minuten lang bei 10.000 U/min und geben Sie dann den Überstand in ein neues Zentrifugenröhrchen.Fügen Sie 650 μl gemischte Flüssigkeit aus Chloroform und Isoamylalkohol hinzu (Volumenverhältnis 24:1), zentrifugieren Sie 5 Minuten lang bei 10.000 U/min und geben Sie den Überstand schließlich in ein neues Zentrifugenröhrchen.Messen Sie die DNA-Konzentration mit einem Spektrophotometer.

3) PCR-Amplifikation.Unter Verwendung des T3-Supermix-Standardsystems: Proben-DNA 2 μl. 0,5 μl Primer für Vorher und Nachher, T3-Supermix 18 μl und ddH₂O7 μl.Die PCR-Amplifikationsbedingung beträgt 95 ℃.Nach 3 Minuten Vordenaturierung werden die folgenden Zyklen durchgeführt: 98 °C für 15 Sekunden, 52 °C für 20 Sekunden, 72 °C für 20 Sekunden und schließlich 72 °C für 5 Minuten, insgesamt 42-maliger Zyklus.

4) DNA-Agarose-Gelelektrophorese.Nehmen Sie 2 μl PCR-Amplifikationsprodukt und 5 kb DNA-Marker, geben Sie es in ein Agarosegel und führen Sie eine Elektrophorese bei 180 V für 20 Minuten durch.Beobachten Sie nach der Elektrophorese die PCR-Produkte im Gel-Imaging-System.

Polh-Upstream-Primer:

AGGGTTTCCCAGTCACGGGCTGAG-GATCCTTT

Polh-Downstream-Primer:

GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT

Lef-8-Upstream-Primer:

AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-GAC

Lef-8-Downstream-Primer:

GAGCGGATAATTTCACATTGTACGGATCTTTCGGC

Lef-9-Upstream-Primer

AGGGTTTCCCAGTCACGAAACGGGTACGCGG

Lef-9-Downstream-Primer:

GAGCGGATAATTTCACATTGTCACCGTCAGTC

Wenden Sie abschließend die DNAMAN6.0-Software an, um die gemessenen Polh-, Lef-8- und Lef-9-Sequenzen zu vergleichen.

1.6Datenanalyse und -verarbeitung

Die experimentellen Daten wurden mit der datenstatistischen Analysesoftware IBM SPSS 22.0 verarbeitet.

Im Experiment zur Bestimmung der insektiziden Aktivität des Virus wird die Anzahl der toten und lebenden Insekten, die mit jeder Konzentration behandelt wurden, gezählt, die Sterblichkeitsrate und der angepasste Prozentsatz der Toten berechnet und in Wahrscheinlichkeitswerte umgewandelt.Die Konzentration jeder Behandlung wird in lg-Werte umgerechnet.Die Virulenz-Regressionsgleichung (Steigung ± SE) wird anhand von Arbeitswahrscheinlichkeitswerten und -gewichten sowie LC berechnet₅₀Wert und seine 95 %-Konfidenzgrenze und führen Sie schließlich einen Chi-Quadrat-Test durch(²).Im Experiment zur Feldkontrollwirkung wurde die Anzahl der lebenden Insekten bei jeder Behandlung gezählt und die Rate der Schädlingsreduktion berechnet.Der Kontrolleffekt wurde mithilfe der Microsoft Excel-Bearbeitungsformel berechnet.Für die Analyse wurde die Duncan-Methode verwendet und eine einfache ANOVA wurde verwendet, um die signifikanten Unterschiede zwischen den Behandlungen zu vergleichen.

Die Diagramme im Text wurden alle mit der Software Microsoft Excel erstellt.

2.Ergebnisse und Analyse

2.1Insektizide Aktivität von AcMNPV gegen Spodoptera frugiperda-Larven

Die Ergebnisse der Indoor-Aktivitätstests (Tabelle 1) zeigen, dass nach 7-tägiger Behandlung die LC₅₀Die Anzahl der AcMNPV-Wirkungen auf Larven im 2. Stadium von Spodoptera frugiperda beträgt 4,1 x 10⁷PIB/ml und der LC₉₀beträgt 1,05 x 10⁸PIB/ml.Nach 10 Tagen Behandlung wurde die LC₅₀Die Zahl der AcMNPV-Wirkungen auf Larven im 2. Stadium beträgt 2,9 x 10⁷PIB/ml und der LC₉₀ist 7,8x10⁷PIB/ml.Der LC₅₀und LC₉₀Die Anzahl der AcMNPV-Wirkungen auf Larven des Herbst-Heerwurms im 2. Stadium nach 7-tägiger Behandlung war jeweils höher als 10 Tage, was darauf hinweist, dass AcMNPV nach 7 Tagen eine gute insektizide Aktivität gegen Larven von Spodoptera frugiperda aufwies.

2.2 Feldkontrolleffekt von AcMNPV.Bt wirkt auf Spodoptera frugiperda-Larven

Die Ergebnisse von Feldstudien zur Wirksamkeit zeigten, dass 10 Millionen AcMNPV.Bt SC (1500 ml/hm²) hatte eine relativ langsame Wirkung auf die Larven von Spodoptera frugiperda.Der durchschnittliche Kontrolleffekt am 1., 3. und 5. Tag nach dem Sprühen betrug 11,57 %, 16,23 % bzw. 15,56 %.Der durchschnittliche Kontrolleffekt am 7. Tag nach dem Sprühen betrug nur 21,88 %.Am 10. Tag nach dem Sprühen stieg die Insektenbekämpfungswirkung jedoch plötzlich auf 68,99 % und die durchschnittliche Bekämpfungswirkung am 15. Tag nach dem Sprühen betrug ebenfalls 66,87 %.Im Vergleich zu den chemischen Wirkstoffen Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15 % (300 ml/hm²) hatte es eine gute Tötungswirkung auf die Larven von Spodoptera frugiperda, wodurch die Zahl der Insektenpopulationen schnell reduziert werden kann.Der durchschnittliche Kontrolleffekt am 1., 3., 5. und 7. Tag nach der Medikation betrug 91,39 %, 92,66 %, 90,71 % bzw. 87,19 %.Allerdings begann der durchschnittliche Kontrolleffekt am 10. Tag nur noch auf 67,63 % abzunehmen, und der durchschnittliche Kontrolleffekt am 15. Tag war auf 51,60 % zurückgegangen.Einzelheiten finden Sie in Tabelle 2.

Gleichzeitig stellten wir auch fest, dass die Abnahmerate der Insekten im Kontrollbereich am 1., 3. und 5. Tag nach der Behandlung negativ war, was auf einen Anstieg der Insektenzahl hinweist.Am 7. Tag nach der Behandlung begann es positiv zu werden (die Insektenpopulation begann abzunehmen).Die durchschnittliche Abnahmerate der Insekten am 10. und 15. Tag betrug 38,25 % bzw. 47,00 %, was höchstwahrscheinlich damit zusammenhängt, dass einige der Larven von Spodoptera frugiperda im Boden zu verpuppen begannen und sich die Generationen nach 10–15 Tagen überlappten .

Zusammenfassend lässt sich feststellen, dass die 10 Millionen AcMNPV.Bt SC (1500 ml/hm²) hat eine gewisse Kontrollwirkung auf Spodoptera frugiperda, die Wirkung ist jedoch langsam und die Wirksamkeit beträgt etwa 10 bis 15 Tage nach der Anwendung.

2.3 Auswirkungen von AcMNPV.Bt auf natürliche Feinde

Bei Feldversuchen wurden die Auswirkungen von 10 Millionen AcMNPV.Untersucht wurden auch Bt-Suspensionen auf natürliche Feinde von Maisschädlingen wie Spinnen, Marienkäfern und Käfern.Die Ergebnisse zeigten, dass 10 Millionen AcMNPV.Die Bt-Suspension verursachte bei natürlichen Feinden wie Spinnen, Marienkäfern und Käfern keinen nennenswerten Schaden, mit durchschnittlich 13,4 natürlichen Feinden pro 100 Pflanzen.Allerdings hatten die chemischen Wirkstoffe Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15 % Suspension eine erhebliche toxische Wirkung auf natürliche Feinde wie Spinnen, Marienkäfer und Käfer.Am ersten Tag nach der Behandlung betrug die durchschnittliche Anzahl natürlicher Feinde auf 100 Maispflanzen nur 3,1 und am dritten Tag nach der Behandlung wurden nur noch 5,2 natürliche Feinde verschiedener Art gefunden (Abbildung 1).Es ist ersichtlich, dass die 10 Millionen AcMNPV.Bt-Suspension hat eine gute Schutzwirkung auf natürliche Feinde von Schädlingen, während Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15 % Suspension relativ größeren Schaden bei natürlichen Feinden anrichtet.

2.4 Molekulare Identifizierung von AcMNPV

Die PCR-Amplifikationsergebnisse verschiedener Testproben zeigten, dass die Amplifikationsfragmente von polh, lef-8 und lef-9 der Proben 1, 2, 3 und 4 konsistent und in der Größe korrekt waren.Die PCR-Produkte der polh-, lef-8- und lef-9-Gene waren 0,54, 0,716 bzw. 0,29 kb groß (Abbildung 2), was beweist, dass AcMNPV eine insektizide Wirkung gegen die Larven von Spodoptera frugiperda aufweist.

Schließlich wurde die DNAMAN 6.0-Software verwendet, um ein Sequenz-Alignment an den amplifizierten Fragmenten von polh, lef-8 und le.f-9 in den Proben 1, 2, 3 und 4 durchzuführen (Abbildung 3).Die Ergebnisse zeigten, dass die Ähnlichkeit zwischen den amplifizierten Sequenzen von polh, lef-8 und lef-9 in den Proben 1, 2, 3 und 4 100 % betrug, was darauf hinweist, dass die Proben 1, 2, 3 und 4 alle von stammen dasselbe Virus AcMNPV.

3. Diskussion

AcMNPV ist ein stäbchenförmiges Insektenvirus, das den Körper von Insekten durch Nahrungsaufnahme infiziert.Das Virus vermehrt sich und breitet sich im gesamten Insektenkörper aus, infiziert nach und nach den gesamten Körper und führt schließlich zum Tod.Die Ergebnisse dieser Studie deuten darauf hin, dass das AcMNPV eine gute biologische Aktivität gegen die Larven von Spodoptera frugiperda aufweist.Sein LC am 7. und 10. Tag betrug 4,1 x 107 bzw. 2,9 x 107 PIB/m und es zeigte gute Kontrolleffekte im Feld.Die gemischte Suspension von 10 Millionen AcMNPV.Bt (1500 ml/hm²) hatte am 10. und 15. Tag nach der Behandlung eine gute durchschnittliche Kontrollwirkung von 68,99 % bzw. 66,87 % und war für natürliche Feinde sicher.Daher sollte die Forschungs- und Entwicklungsgeschwindigkeit beschleunigt werden, damit AcMNPV eine größere Rolle bei der biologischen Bekämpfung von Spodoptera frugiperda spielen kann.Die von Wuhan Chuqiang Biotechnology Co., Ltd. hergestellte 10 Millionen AcMNPV.Bt-Suspension ist eine Verbindung aus AcMNPV und dem Biopestizid Bacillus thuringiensis (Bt), die die insektizide Aktivität des Virus erheblich verbessern kann.Da es sich bei Bt um ein Breitbandinsektizid mit guter mikrobieller insektizider Wirkung handelt, sollte die Toxizität von AcMNPV in Kombination mit Bt im Vergleich zu einer Einzelformulierung deutlich verbessert werden.Dadurch wird nicht nur das insektizide Wirkungsspektrum von Bt erweitert, sondern auch seine Toxizität erhöht, wodurch das Ziel erreicht wird, mit einer einzigen Formulierung mehrere Schädlinge zu bekämpfen.Dies ist auch der Grund, warum die Aussetzung von 10 Millionen AcMNPV.Bt in Gemüse, Obstbäumen und Reis weithin gefördert werden kann.Daher können 10 Millionen AcMNPV.Bt als grünes Bekämpfungsmittel für Spodoptera frugiperda in Mais gefördert werden

In dieser Studie wurde bei der Durchführung von Feldwirksamkeitstests im Falle eines schnellen Rückgangs der Insektenpopulation im Kontrollgebiet (die Abnahmerate der Insekten am 15. Tag erreichte 47,00 %) die durchschnittliche Kontrollwirkung von 10 Millionen AcMNPV.Bt Suspension (1500 ml/hm²) am 15. Tag nach der Behandlung lag bei 66,87 %, was einen rasch steigenden Trend zeigt.Während die durchschnittliche Kontrollwirkung des chemischen Pestizids 15 % Methoxazol · Indefencarb SC (300 ml/hm) beträgt²) am 15. Tag nach der Behandlung sank auf 51,60 %.Obwohl ersichtlich ist, dass die 10 Millionen AcMNPV.Bt-Suspension (1500 ml/hm²) hat am 10. bis 15. Tag eine gewisse Kontrollwirkung auf Spodoptera frugiperda. Angesichts der langsamen Wirksamkeit biologischer Pestizide und der kurzen Lebensdauer und überlappenden Generationen von Spodoptera frugiperda-Larven wird empfohlen, die Anzahl der Untersuchungen zu erhöhen und die Untersuchungszeit zu verlängern Durchführung von Feldwirksamkeitsversuchen mit biologischen Pestiziden (insbesondere Viruspräparaten), mit denen möglicherweise bessere experimentelle Ergebnisse erzielt werden.Dies ist auch eine Einschränkung dieser Studie.Zusammenfassend lässt sich sagen, dass chemische Wirkstoffe im Vergleich zu biologischen Wirkstoffen eine relativ höhere Tötungswirkung auf Schädlinge haben und schnell wirken.Sie können als Notfallvorbeugungs- und Kontrollmaßnahme bei Schädlingsausbrüchen eingesetzt werden.Wenn der Schaden durch Schädlinge relativ gering ist, können biologische Pestizide als eine der umweltfreundlichen Präventions- und Kontrollmaßnahmen chemische Pestizide ersetzen und so die Umweltverschmutzung verringern und den Effekt des Schutzes der Agrarökologie erzielen.

Darüber hinaus ist das in dieser Studie verwendete Polh-Gen (Polyhedrin) eine Art polyedrischer Proteinpromotor. Es und P10 sind die am häufigsten verwendeten Promotoren im Baculovirus-Expressionsvektorsystem (BEVS), die beide im Spätstadium stark exprimiert werden einer Virusinfektion^[13].Allerdings ist die Aktivität des p10-Promotors geringer als die des polh-Promotors, weshalb der polh-Promotor häufig für die Expression exogener Proteine ​​verwendet wird.Das Gen lef-8 kann die größte Untereinheit der viruseigenen RNA-Polymerase kodieren und ist eine Art Spätexpressionsfaktor^[14].Lef-9 ist eine Art später Expressionsfaktor, der zusammen mit Lef-4, Lef-8 und p47 die Proteinkomplex-Untereinheit in Baculoviren kodiert.Untersuchungen haben ergeben, dass Viren, denen das lef-9-Gen fehlt, keine Viruspartikel mit infektiöser Aktivität erzeugen können, während Viren mit dem lef-9-Gen die infektiöse Aktivität des Virus durch Wiederherstellung wiederherstellen können.Daher ist das lef-9-Gen ein essentielles Gen für das Baculovirus, um BV (Budded Virus) mit infektiöser Aktivität zu bilden^[15].Es ist ersichtlich, dass die Gene lef-8 und lef-9 bei verschiedenen Arten von Kernpolyederviren einen hohen Konservatismus aufweisen, sodass die Gene lef-8 und lef-9 als Grundlage für die Identifizierung von Virustypen verwendet werden können.Daher wurden in dieser Studie polh, lef-8 und lef-9 als Erkennungsobjekte verwendet, und durch die Gensequenzausrichtung war die Homologie hoch und erreichte alle 100 %.Die schnelle molekulare Nachweismethode bestätigte erneut, dass AcMNPV eine gute insektizide Wirkung gegen Spodoptera frugiperda aufweist, die für eine weitere Förderung und Anwendung bei der Prävention und Bekämpfung von Spodoptera frugiperda geeignet ist.

Seit 2019 ist der Spodoptera frugiperda in China eingedrungen und hat sich zu einem wichtigen Maisschädling entwickelt.In einigen Gebieten im Süden und Südwesten Chinas hat sich eine sesshafte Bevölkerung gebildet, die der chinesischen Maisindustrie enorme Verluste verursacht und die Ernährungssicherheit Chinas ernsthaft gefährdet^[16].Angesichts der aktuellen schwierigen Präventions- und Bekämpfungssituation von Spodoptera frugiperda in China ist es dringend erforderlich, das Screening und die Entwicklung wirksamer Pestizide zur Prävention und Bekämpfung von Spodoptera frugiperda zu beschleunigen^[17].Obwohl virale Insektizide aufgrund ihrer langsamen Wirkungsgeschwindigkeit und ihres schmalen insektiziden Spektrums ihre weitverbreitete Anwendung eingeschränkt haben, wird erwartet, dass Baculovirus-Insektizide aufgrund ihrer erheblichen Vorteile gegenüber Baculovirus-Insektiziden in zunehmendem Maße in der landwirtschaftlichen Produktion eingesetzt werden traditionelle Pestizide.Aufgrund der Anfälligkeit von Insektenviruspräparaten gegenüber äußeren Bedingungen wie hohen Temperaturen, Sonnenlicht, Regen und dem Alter der Schädlinge[18].Daher wird empfohlen, Pestizide während der Hauptphase des Auftretens von Schädlingslarven einzusetzen.Es ist am besten, es an sonnigen Tagen nach 16:00 bis 17:00 Uhr zu verwenden, um die Auswirkungen widriger Umweltbedingungen wie hohe Temperaturen und Licht zu vermeiden, damit die Virusformulierung ihre Rolle besser spielen und die Bekämpfungswirkung auf Schädlinge verbessern kann .